為細胞換液時,要沿著培養瓶的一側輕輕地加入,而不是直接加到細胞中,以免損傷細胞,當培養的細胞株較為脆弱時尤其需要注意。
使用無菌玻璃吸管或一次性塑料吸管和移液器操作液體時,每支吸管只能使用一次,以免交叉污染。
在培養細胞的過程中,換液是一項非常常規操作,它主要是為了清除細胞在生長過程中產生的各種代謝廢物,補充新鮮的培養基,促進細胞生長。那么,如何更換細胞培養瓶內的溶液呢?
1、將器材放入超凈臺,打開紫外照射滅菌,若是培養的細胞對溫度比較敏感,可以將含血清的培養基瓶放入37℃的水浴箱使得培養基溫度在37℃,再轉移到超凈臺紫外滅菌。另外,細胞培養間也需要紫外照射半小時左右。
2、從培養箱取出細胞培養瓶,用酒精噴壺在瓶子表面噴灑75%酒精消毒,轉移到超凈臺,打開蓋子,輕輕吸出舊的培養液,可用移液器加入新鮮含血清培養基,注意一定不要從細胞貼壁面加入培養基,應從側壁加,動作輕柔,以免沖落細胞。
3、加好培養基后,蓋上蓋子,在瓶子上做標記,注明換液時間,細胞種類,操作人員等信息。
4、放入培養箱之前應再次用酒精噴一噴瓶子表面,然后應記得整理操作臺,用酒精擦拭超凈臺臺面,清理廢液和垃圾。
在進行換液操作時,全程注意無菌,操作人員要穿好滅菌服,戴好滅菌手套和口罩,手接觸到細胞培養瓶瓶口時一定要小心,避免造成污染。